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第134章 黎明前的测序(2/4)

:老江,大半夜的,出什麽事了?嫂子呢?

    江河简单回答:你嫂子在酒店,附一院有紧急情况,我们要连夜做个研究。

    啊?程溪瑶一愣,嫂子来了?

    这不是重点吧!易向晚有些紧张道,原来是紧急情况吗?可是老大,咱都是新手啊?你怎麽不去找附一院检验科的人?

    答案很简单。

    检验科的老师们有自己的操作习惯。

    如果江河去指挥他们,他们会质疑为什麽不加这个试剂,为什麽要改那个参数。

    沟通成本极高。

    但这六个人不同。

    过去的一段时间里,江河给他们进行了地狱般的RNA提取理论授课。

    他们对江河的话言听计从,执行江河的作业程序不会有任何折扣。

    所以,江河道:听好,医院收治了一例极高危的不明原因重症肺炎患者,现在我怀疑是一种新型的重组流感病毒,我们需要在今晚,提取出病毒的RNA,逆转录成A,跑出PCR扩增片段,然後上机测序,拿到它的基因序列证明。

    六个人:???

    唐培:老,老大……这什麽未知病毒的,我们做……安全吗?

    送来的样本是经过硫氰酸胍彻底裂解灭活的,它现在只是一堆核酸物质,没有传染性,这和我们前几天培训的提取外周血游离miRNA的底层逻辑完全一致,甚至因为我们要提取的是病毒的基因组RNA,丰度更高,操作上反而更容易。

    重点是,防止环境里的RNA酶降解样本。

    江河严肃道:你们是我亲自教出来的,我对你们的实验规范有绝对的信心,今晚的操作,每一步都必须严格按照我教的规范来,不许有任何多余的动作,听明白了吗?

    明白!陆晓林年纪最长,第一个出声回应。

    明白了老江,你说咋干就咋干。陈浩拍了拍脸,让自己彻底清醒。

    去更衣室,穿两层隔离衣,戴双层乳胶手套,N95口罩,护目镜,进核心区。

    淩晨3:15。

    柯正提着一个密封的生物安全转运箱来到了实验室门口。

    他把箱子交给江河:江河,这是马克的深部支气管肺泡灌洗液,已经加了裂解液灭活了。

    好。

    江河接过箱子,转身刷卡进入实验室核心区,立刻说道:

    第一组,陈浩、向晚,你们负责配制试剂,所有的dEPC水、无水乙醇、异丙醇,全部重新开封新的,确保绝对无RNA酶污染,操作台用RNaseZap喷洒擦拭两遍。

    第二组,程溪瑶、唐培,你们负责给所有的移液枪换上带滤芯的枪头,准备好离心管和冰盒。

    师兄,亦舟,你们俩配合我,准备过柱子提取。

    江河站在超净工作台前,将转运箱打开,取出装有灭活样本的冻存管。

    开始。

    实验室内。

    严肃,高效。

    这群年纪轻轻的学生,此刻展现出了惊人的纪律性。

    这就是培训的成果!

    江河拿起一把P1000的移液枪,套上带滤芯的枪头。

    加入Trizol试剂,1毫升。

    将样本移入新的离心管中,注入Trizol。

    透明的液体瞬间混合。

    室温静置5分钟,让核蛋白复合体彻底解离。

    江河看了一眼墙上的挂锺。

    五分钟一到。

    加氯仿,0.2毫升。

    盖紧管盖,剧烈振荡15秒。

    静置3分钟。

    顾亦舟在一旁已经打开了高速冷冻离心机的盖子,温度已经预冷到了4c。

    放入离心机,配平,12000转,15分钟。

    这15分钟极其漫长。

    滴——

    离心机停止。

    江河小心翼翼取出离心管。

    在冷光的照射下,管内的液体清晰地分成了三层:

    底层是红色的酚氯仿相,中间是一层薄薄的白色蛋白交界面,最上层是无色的水相。

    所有的病毒RNA,都溶解在这最上层的无色水相中。

    江河深吸了一口气,换了一把P200的移液枪。

    这一步是整个提取过程中最关键的一步。

    如果吸到了中间的蛋白层或者底层的有机相,整个样本就废了。

    他将手肘支撑在台面上,按下移液枪的按钮。

    枪尖精准悬停在无色水相的中央,缓缓吸取了400微升的液体,移入一个全新的无酶离心管中。

    全程,江河的手没有一丝颤抖。

    外科医生的定力,在这一刻展现得淋漓尽致。

    陆晓林在旁边看得头皮发麻。

    ——哪怕是浸淫实验室多年的老研究员,悬空吸取水相时也难免会有细微的晃动,但江河的手就像是被焊死了一
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